管腔器械多酶清洗劑穿透測試

管腔器械多酶清洗劑穿透測試的重要性與行業(yè)背景

在現(xiàn)代醫(yī)療領域，管腔器械(如內(nèi)鏡、導管、腹qiang鏡等)的清洗消毒質(zhì)量直接關系到患者安全和醫(yī)療效果。這類器械由于其復雜的內(nèi)部結(jié)構(gòu)(細長管腔、彎曲通道、盲端等)，容易成為生物負荷殘留的“重災區(qū)"。數(shù)據(jù)顯示，約 15% 的醫(yī)院感染事件與醫(yī)療qi械清洗不徹di直接相關，其中管腔器械的清洗合格率僅為 78.3%，顯著低于普通器械的 92.5%(數(shù)據(jù)來源：《中國感染控制雜志》2024 年第 3 期)。多酶清洗劑作為去除有機污染物(血液、組織液、黏液等)的核心試劑，其在管腔內(nèi)部的穿透能力和清洗效果，成為衡量清洗質(zhì)量的關鍵指標。

管腔器械多酶清洗劑穿透測試，正是針對這一痛點開發(fā)的專業(yè)檢測項目。它通過模擬臨床使用場景，評估清洗劑在不同材質(zhì)、不同管徑、不同長度的管腔器械內(nèi)的流動特性、活性成分分布及污染物去除效率，為清洗劑的研發(fā)、選型和臨床應用提供科學依據(jù)。目前，該測試已被納入《醫(yī)院消毒供應中心第 3 部分：清洗消毒及滅菌效果監(jiān)測標準》(WS 310.3 - 2016)的強制監(jiān)測項目，足見其在醫(yī)療安全體系中的重要地位。

管腔器械多酶清洗劑穿透測試的核心檢測標準與方法

一、檢測標準體系

管腔器械多酶清洗劑穿透測試嚴格遵循國內(nèi)外權(quán)wei標準，確保檢測結(jié)果的科學性和可比性：

國家標準：

WS 310.3 - 2016：明確規(guī)定管腔器械清洗效果的監(jiān)測方法，要求對內(nèi)徑 ≤ 1mm 的器械進行專門的穿透性能評估。

GB 27950 - 2011《手和皮膚消毒效果的測試方法》：雖主要針對皮膚消毒，但其中的微生物挑戰(zhàn)試驗方法被借鑒用于管腔污染物去除效率的測定。

國際標準：

ISO 15883 - 4:2006《yi用qing洗消毒器 第 4 部分：對管腔器械清洗效果的測試》：提供了管腔穿透測試的詳細流程，包括管腔模型的規(guī)格、污染物的制備、清洗劑濃度的選擇等。

EN 13060:2012《小型蒸汽滅菌器》：附錄 C 中關于管腔器械滅菌前清洗效果的驗證方法，為穿透測試的污染物模擬提供參考。

行業(yè)規(guī)范：

《內(nèi)鏡qing洗消毒技術操作規(guī)范（2022 年版）》：要求內(nèi)鏡清洗時必須使用符合穿透性能要求的多酶清洗劑，并定期進行效果監(jiān)測。

二、核心檢測方法

管腔器械多酶清洗劑穿透測試采用模擬管腔模型法，通過構(gòu)建不同規(guī)格的人工管腔，模擬臨床器械的復雜結(jié)構(gòu)，具體步驟如下：

管腔模型制備：

材質(zhì)：選用與臨床器械一致的材料，如不銹鋼(304 或 316L)、聚四氟乙烯(PTFE)、硅膠等。

規(guī)格：根據(jù) WS 310.3 - 2016 要求，至少包含以下三種模型：

直管模型：內(nèi)徑 1mm、長度 500mm

彎曲模型：內(nèi)徑 2mm、長度 300mm、彎曲角度 90°(曲率半徑 15mm)

分支模型：內(nèi)徑 3mm、主長度 400mm、分支長度 100mm(分支角度 45°)

內(nèi)壁處理：部分模型進行噴砂或電解蝕刻，模擬使用后的器械內(nèi)壁粗糙度(Ra 值 1.6 - 3.2μm)。

污染物制備與負載：

標準污染物：按照 ISO 15883 - 4 配方，由 80% 新鮮豬全血(抗凝處理)、15% 牛血清白蛋白、5% 干燥人血紅蛋白混合而成，蛋白質(zhì)濃度控制在 65 - 75g/L。

負載方法：使用微量zhu射泵將污染物均勻注入管腔模型，每 cm2 內(nèi)壁面積負載 0.1mL 污染物，37℃ 烘干 2h 形成干涸污染物層。

清洗與穿透測試流程：

清洗劑配制：按照產(chǎn)品說明書推薦濃度(通常 0.5 - 2.0%)，用 30 - 40℃ 去離子水配制測試溶液，pH 值調(diào)節(jié)至 7.0 - 8.0(中性多酶清洗劑)。

清洗方式：

浸泡法：將管腔模型完quan浸入清洗劑溶液，30℃ 靜置 5min，模擬手工清洗浸泡過程。

沖洗法：使用蠕動泵以 20mL/min 流速將清洗劑溶液連續(xù)沖洗管腔，持續(xù) 2min，模擬清洗機噴淋過程。

超聲輔助法：若產(chǎn)品宣稱超聲適用性，需在 40kHz 超聲清洗槽中進行，功率密度 0.3W/cm2。

穿透效果評估：

采樣點設置：在管腔模型的入口端、中段、末端及彎曲/分支處設置采樣口，收集清洗后的殘留液。

殘留蛋白質(zhì)測定：采用考馬斯亮藍法(Bradford 法)，使用紫外分光光度計(如島津 UV - 2600)在 595nm 波長處測定吸光度，計算殘留蛋白質(zhì)濃度(檢測限 0.01mg/mL)。

酶活性分布測定：通過熒光底物法(如 Boc - Val - Leu - Lys - AMC)，檢測管腔不同位置清洗劑的蛋白酶活性，反映活性成分的穿透均勻性。

結(jié)果判定標準：

殘留蛋白質(zhì)：管腔末端殘留蛋白質(zhì)濃度應 ≤ 0.1mg/mL，且與入口端殘留量比值 ≥ 0.8(表明穿透均勻)。

酶活性：管腔各采樣點的酶活性變異系數(shù)(CV)應 ≤ 20%。

污染物去除率：總?cè)コ?1 - 殘留蛋白質(zhì)總量/初始負載量)應 ≥ 99.5%。

管腔器械多酶清洗劑穿透測試的關鍵儀器與設備

管腔器械多酶清洗劑穿透測試對儀器設備的精度和穩(wěn)定性要求ji高，核心設備包括：

一、管腔模型制備與負載設備

精密車床與銑床：用于加工不同規(guī)格的金屬管腔模型，保證內(nèi)徑公差 ± 0.05mm，如哈斯 ST - 10 數(shù)控車床。

內(nèi)壁粗糙度儀：如泰勒霍普森 Surtronic S - 100.用于測量管腔內(nèi)壁 Ra 值，確保模擬真實性。

微量zhu射泵：如 Harvard Apparatus PHD 2000.精度 0.1μL/min，實現(xiàn)污染物的均勻負載。

二、清洗與穿透測試設備

恒溫水浴槽：如 Thermo Scientific HAAKE DC10.控溫精度 ± 0.1℃，維持清洗劑溫度穩(wěn)定。

蠕動泵與注射泵：

蠕動泵：如 Watson - Marlow 323DU，流速范圍 0.001 - 100mL/min，用于管腔沖洗。

注射泵：如 KD Scientific Legato 100.用于精準控制清洗劑流量和壓力。

超聲清洗機：如 Branson CPX - 952 - 814R，頻率 40kHz，功率可調(diào)，模擬超聲清洗條件。

管腔采樣裝置：定制的多通路采樣閥，可在不拆卸模型的情況下采集管腔不同位置的殘留液。

三、分析與檢測設備

紫外可見分光光度計：如島津 UV - 2600.配備微量比色皿(100μL)，用于蛋白質(zhì)濃度測定。

熒光分光光度計：如 PerkinElmer LS 55.激發(fā)波長 380nm，發(fā)射波長 460nm，用于酶活性檢測。

高效液相色譜儀（HPLC）：如 Agilent 1260 Infinity，配備 C18 色譜柱(5μm，4.6×250mm)，用于分析清洗劑中活性成分的濃度分布(如蛋白酶、淀fen酶等)。

生物顯微鏡：如 Olympus BX53.配備微分干涉相差(DIC)裝置，觀察管腔內(nèi)壁污染物殘留形態(tài)。

四、質(zhì)量控制設備

電子天平：如 Mettler Toledo XS205DU，精度 0.1mg，用于污染物和清洗劑的精確稱量。

pH 計：如 Sartorius PB - 10.精度 ± 0.01pH，監(jiān)測清洗劑溶液的酸堿度。

conductivity meter：如 Metrohm 712 Conductometer，測定清洗劑溶液的電導率，間接反映濃度均勻性。

管腔器械多酶清洗劑穿透測試的關鍵指標與結(jié)果分析

一、關鍵檢測指標

管腔器械多酶清洗劑穿透測試的核心指標可分為物理穿透指標和化學/生物效果指標兩大類：

物理穿透指標：

穿透時間：清洗劑溶液從管腔入口端到達末端的時間，直管模型應 ≤ 10s，彎曲模型應 ≤ 20s。

流動均勻性：通過壓力傳感器(如 Honeywell ASCX系列)監(jiān)測管腔不同位置的壓力降，變異系數(shù)應 ≤ 15%。

泡沫殘留量：按照 ASTM D1173 - 21 方法，測定清洗后管腔內(nèi)的泡沫高度，應 ≤ 5mm(避免影響后續(xù)消毒滅菌)。

化學/生物效果指標：

殘留蛋白質(zhì)濃度：前文已詳述，是評估污染物去除效果的直接指標。

酶活性保留率：管腔末端清洗劑的酶活性與初始溶液活性的比值，應 ≥ 85%(表明活性成分未被管腔吸附或降解)。

ATP 生物負荷：使用 ATP 生物熒光檢測儀(如 3M Clean - Trace NG3)，檢測管腔殘留的 ATP 含量，應 ≤ 10RLU(相對光單位)。

模擬生物膜去除率：對于宣稱抗生物膜功能的產(chǎn)品，需采用銅綠假單胞菌(PAO1 株)生物膜模型，通過平板計數(shù)法測定去除率，應 ≥ 99.9%。

二、典型結(jié)果分析與案例

案例：某品牌中性多酶清洗劑的穿透測試

測試條件：

管腔模型：不銹鋼直管(1mm×500mm)、硅膠彎曲管(2mm×300mm，90°彎曲)

清洗劑濃度：1.0%，溫度 35℃

清洗方式：蠕動泵沖洗(20mL/min，2min)

測試結(jié)果：

結(jié)果分析：

該產(chǎn)品在直管和彎曲模型中均符合判定標準，殘留蛋白質(zhì)和 ATP 含量較低，表明穿透效果良好。

彎曲模型末端的殘留蛋白質(zhì)略高于入口端(0.07 vs 0.05mg/mL)，可能與彎曲處湍流效應導致污染物剝離難度增加有關，建議在臨床使用時適當延長彎曲管腔的沖洗時間。

酶活性保留率均 ≥ 85%，說明該產(chǎn)品的活性成分在管腔內(nèi)的穩(wěn)定性較好，未發(fā)生顯著吸附或失活。

常見不合格情況及原因分析

穿透時間過長（> 30s）：

可能原因：清洗劑黏度偏高(> 5mPa·s，25℃)、表面張力過大(> 40mN/m)，或管腔內(nèi)壁有油污等疏水性污染物。

改進建議：優(yōu)化配方降低黏度(如添加低分子量表面活性劑)、預處理管腔去除疏水性污染物。

末端殘留蛋白質(zhì)超標（> 0.1mg/mL）：

可能原因：蛋白酶活性不足(< 500U/mL)、清洗劑與管腔材質(zhì)不兼容(如硅膠對某些酶成分的吸附)。

改進建議：提高蛋白酶濃度或選用耐吸附的酶制劑(如包裹型蛋白酶)、針對特定材質(zhì)優(yōu)化配方。

酶活性分布不均（CV > 20%）：

可能原因：清洗劑中酶成分與其他添加劑(如螯合劑)發(fā)生相互作用，或攪拌不充分導致局部濃度差異。

改進建議：調(diào)整配方避免酶 - 添加劑相互作用、采用分步溶解工藝確?；旌暇鶆?。

管腔器械多酶清洗劑穿透測試的質(zhì)量控制與注意事項

一、檢測過程的質(zhì)量控制

陽性對照與陰性對照：

陽性對照：使用已知穿透性能良好的標準清洗劑(如美國 3M 多酶清洗劑)，同步進行測試，確保實驗體系有效性。

陰性對照：用去離子水代替清洗劑，驗證污染物自然脫落率(應 ≤ 5%)。

儀器校準：

紫外分光光度計、熒光分光光度計需每日用標準溶液校準(如牛血清白蛋白標準品、熒光底物標準品)。

蠕動泵、注射泵每月用稱重法校準流速(誤差 ≤ ± 2%)。

人員操作規(guī)范：

操作人員需經(jīng)過 WS 310.3 - 2016 標準培訓，熟練掌握管腔模型的裝卸和采樣技巧。

污染物負載、清洗、采樣等關鍵步驟需雙人復核，確保操作一致性。

二、樣品前處理注意事項

樣品保存：清洗劑樣品需在 2 - 8℃ 避光保存，測試前平衡至室溫(25℃ ± 2℃)，開封后 24h 內(nèi)使用。

濃度驗證：測試前需用滴定法或折光儀驗證清洗劑濃度，確保與標稱值一致(偏差 ≤ ± 5%)。

pH 調(diào)節(jié)：若產(chǎn)品 pH 范圍較寬(如 6.0 - 8.5)，需用 0.1mol/L HCl 或 NaOH 精確調(diào)節(jié)至中間值(7.2 ± 0.1)，避免 pH 對酶活性的影響。

三、管腔模型的維護與管理

清潔與滅菌：每個模型使用后需用 0.5% 次氯酸鈉溶液浸泡 30min，再用去離子水沖洗至中性，121℃ 高壓滅菌 20min，避免交叉污染。

使用壽命：金屬模型使用 50 次后需重新檢測內(nèi)徑和粗糙度，硅膠模型使用 20 次后更換，確保模型狀態(tài)穩(wěn)定。

標識管理：每個模型需編號并記錄使用次數(shù)、維護歷史，建立“一人一模型一記錄"的追溯體系。

管腔器械多酶清洗劑穿透測試的發(fā)展趨勢與展望

隨著微創(chuàng)技術的普及，管腔器械的結(jié)構(gòu)日益復雜(如超細內(nèi)鏡、多通道介入導管)，對清洗劑穿透性能的要求不斷提高。未來，管腔器械多酶清洗劑穿透測試將呈現(xiàn)以下發(fā)展趨勢：

仿生模型的開發(fā)：基于 3D 打印技術，制造更接近臨床器械真實結(jié)構(gòu)的仿生管腔模型，如帶有微溝槽、微孔的復雜模型，提高測試的臨床相關性。

實時監(jiān)測技術的應用：結(jié)合光纖傳感器、微型 pH 電極等技術，實時監(jiān)測清洗劑在管腔內(nèi)的流動狀態(tài)和活性變化，獲得動態(tài)穿透數(shù)據(jù)。

多污染物體系的建立：除蛋白質(zhì)外，將脂類、糖類、生物膜等復雜污染物納入測試體系，更全面評估清洗劑的穿透和去除能力。

國際標準的統(tǒng)一：目前各國標準在管腔模型規(guī)格、污染物配方等方面存在差異，未來有望形成統(tǒng)一的 ISO 標準，促進全qiu清洗劑產(chǎn)品的質(zhì)量互認。

作為專業(yè)的第三方檢測機構(gòu)，我們將持續(xù)關注行業(yè)發(fā)展動態(tài)，不斷優(yōu)化檢測方法和設備，為清洗劑生產(chǎn)企業(yè)和醫(yī)療機構(gòu)提供科學、準確的檢測數(shù)據(jù)，助力提升管腔器械清洗質(zhì)量，保障患者醫(yī)療安全。